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高效液相色儀(HPLC)譜菜鳥掃盲篇

2021-02-23 08:31:20來源:admin
高效液相色譜(HPLC)是集成化很高的儀器。它包括了泵輸送流動(dòng)相,六通閥的進(jìn)樣,色譜柱的分離,檢測(cè)器的檢測(cè)和記錄積分設(shè)備的記錄和數(shù)據(jù)計(jì)算構(gòu)成的。
 
高效液相色譜(HPLC)的工作原理
 
氣相色譜儀用氮?dú)饣蛘吆庾鲚d氣,把載氣換成流動(dòng)相(Mobile phase),流動(dòng)相也稱為載液。高效液相色儀(HPLC)是通過管路連接這各個(gè)部件按,流動(dòng)相在泵的驅(qū)動(dòng)下,流經(jīng)色譜的全系統(tǒng)到達(dá)廢液,樣品經(jīng)過了流通閥,進(jìn)入色譜系統(tǒng),在流動(dòng)相的帶領(lǐng)下,進(jìn)入色譜柱進(jìn)行分離。被分離的樣品中各個(gè)成分,進(jìn)入檢測(cè)器,被檢測(cè)。由記錄儀記錄檢測(cè)信號(hào),流經(jīng)廢液?;蛘弑皇占_@就是高效液相色譜(HPLC)的整個(gè)系統(tǒng)工作描述。
 
高效液相色譜(HPLC)的各系統(tǒng)
 
HPLC是有五大系統(tǒng)構(gòu)成:動(dòng)力系統(tǒng),進(jìn)樣系統(tǒng),分離系統(tǒng),檢測(cè)系統(tǒng),數(shù)據(jù)分析和記錄系統(tǒng)構(gòu)成。
其中:
動(dòng)力系統(tǒng):泵
進(jìn)樣系統(tǒng):六通閥和進(jìn)樣針,或者自動(dòng)進(jìn)樣器
分離系統(tǒng):色譜柱
檢測(cè)系統(tǒng):檢測(cè)器,一般有紫外檢測(cè)器,熒光檢測(cè)器,示差折光檢測(cè)器,MS檢測(cè)器等等。
記錄系統(tǒng):電腦工作站等
連接這些設(shè)備的都是由一根根不銹鋼管或者PEEK管構(gòu)成。
 
高效液相色譜(HPLC)的動(dòng)力系統(tǒng):泵
 
泵是HPLC的動(dòng)力系統(tǒng)。氣相色譜的動(dòng)力,實(shí)際上是鋼瓶中氣體的壓力。而液體,它只有通過泵的轉(zhuǎn)動(dòng)而使之流動(dòng)。
我們做一個(gè)類比:血液類比成流動(dòng)相,心臟類比成泵。血管類比成各不銹鋼管。那么,血液在心臟作為動(dòng)力系統(tǒng),流經(jīng)著身體的各個(gè)系統(tǒng)。如果心臟跳得快點(diǎn),那么血流量加大,那么血壓升高。同樣,泵流速提高,流動(dòng)相流量增大,那么色譜系統(tǒng)壓力增高;如果血管被壓迫半堵了,那么同樣的心跳速度,壓力也會(huì)增高。同樣道理,如果色譜系統(tǒng)被污染,那么污染物堵在色譜柱頭,或者各連接口等,那么泵同樣的流速,就有可能壓力變大。高效
 
HPLC記錄系統(tǒng)主要記錄色譜圖,并且對(duì)色譜圖進(jìn)行面積計(jì)算(積分)。同時(shí)可以用軟件計(jì)算出其他,比如峰寬,塔板數(shù),拖尾因子等。同時(shí)也可以通過輸入稱樣量和稀釋倍數(shù),計(jì)算出測(cè)試樣品中各組分的含量。

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