色譜分析通常首先得定性分析，最終是定量分析，所以定性分析是非常重要且不可忽視的。定性分析一般是用色譜峰保留時間來體現的，這就對色譜峰保留時間有了要求，保留時間得穩定，不能有大的變化，否則定性分析可能就會出錯或影響定量分析（色譜峰寬、峰高、峰面積與保留時間有一定關系，一般保留時間短色譜峰寬小，峰高高，峰面積偏小；保留時間長色譜峰寬大，峰高低，峰面積偏大）。

實驗員在實驗過程中經常會碰到色譜峰前移或后移的現象（色譜峰保留時間逐漸變短說明色譜峰前移，色譜峰保留時間逐漸變長說明色譜峰后移），有時會對實驗結果產生不小的影響。下面我們就以高效液相色譜為例簡單介紹介紹這一類問題發生的原因及應對辦法。

色譜講究的是分離，保留時間長短主要也是由色譜分離決定的。影響色譜分離的因素主要有色譜柱、流動相、流速、色譜柱溫度等。

溫度影響色譜柱分離時間，一般色譜柱溫度越高色譜分離越快，保留時間越短，反之相反。如果早上上班實驗室溫度較低，開啟加熱設備開始工作，實驗室溫度逐漸升高，如果在這期間實驗，色譜峰保留時間會越來越短。如果上班實驗室溫度較高，開啟制冷設備開始工作，實驗室溫度逐漸降低，如果在這期間實驗，色譜峰保留時間會越來越長。所以實驗時實驗室溫度一定得穩定，不能有大的變化或波動，避免空調等控溫設備正對著液相色譜儀或近距離吹風。另外系統中加一個可能的柱溫箱也是很好的選擇。

流速影響。在允許范圍內流速越大色譜分離越快。儀器開啟后液相泵要大流速沖洗（廢液從放空閥排走），以便泵流速快速達到正常。一般由于實驗室溫度、流動相中氣泡、液相泵內之前的流動相等影響，液相泵開啟后流速偏低而后緩慢升高，如果流速沒平衡好就開始實驗，色譜峰保留時間越來越短。大家都知道流動相中氣泡多會影響液相泵流速。有的液相色譜儀沒配在線脫氣機，脫氣靠超聲波振動儀，這樣的話剛振動脫完氣的流動相中氣泡較少，液相泵流速不受影響，但時間一長，空氣中的氣體又會溶解到流動相中，流動相中氣泡又會多，泵流速又會降低，色譜峰保留時間又會變長。流速是色譜條件的重要組成部分，所以液相泵流速一定要控制好，最好配上在線脫氣機。

流動相成分影響。大家都知道對于反相色譜，流動相中有機相成分含量越高色譜峰保留時間越短，反之越長。這個配好的流動相正常情況下對色譜峰保留時間是沒有影響的，但有一種情況有影響。流動相中有機相成分很多時候是會揮發的，尤其是流動相不多的時候相對揮發的會更快，這個時候流動相中有機相成分比例下降，實驗時色譜峰保留時間會越來越長。所以實驗時流動相不多了有時也會影響色譜峰保留時間，如果對實驗要求較高，建議這時添加流動相或停止實驗。有人這時可能會問多少算多，多少算不多，個人建議100ml為界 ，100ml以內算不多。

色譜柱影響。色譜柱柱效下降，分離效率也就下降了，色譜峰保留時間也就越來越長了。那什么會影響色譜柱柱效呢？第一色譜柱長時間連續使用柱效會下降；第二單次實驗后對色譜柱洗脫時間不夠或洗脫的不充分，色譜柱柱效會慢慢下降；第三色譜柱受污染柱效會下降；第四色譜柱也有壽命，使用的時間長了色譜柱離報廢的時間就會越來越短，柱效也就會越來越低，色譜峰保留時間就會越來越長。這個使用時就得多注意了，尤其色譜柱，維護的好了用的效果也好壽命也長，維護不好用不幾次可能就報廢了。

色譜峰前移或后移影響實驗效果，以上總結了四方面影響色譜峰前移或后移的原因及解決辦法，供廣大實驗室同胞們參考討論。